备注：ROX Reference 为另行选配试剂，本产品未含。不同型号 Real-Time PCR 仪，使用方法如下：
1) ROX Reference Ⅰ (50×)为高浓度 ROX，适用于如下型号 Real Time PCR 仪：
- Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
- Applied Biosystems 7900 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
- Step One Plus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)。
2) ROX Reference Ⅱ (50×)为低浓度 ROX， 适用于如下型号 Real Time PCR 仪：
- Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)；
- Applied Biosystems 7500 FAST Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)。
3) 当使用于如下型号 Real Time PCR 扩增仪时，无需加入 ROX Reference：
- Roche、Bio-Rad、TaKaRa 等其它无需加入 ROX 校准染料的 Real-Time PCR 仪。


产品描述：           产品中使用了经过定向改造、并进行了抗体封闭的直扩型热启动聚合酶(Hot-Start DNA Polymerase)，配 合条件优化的热启动 qPCR 专用缓冲体系，对血液样本中的 PCR 抑制物具有极强的耐受性，可有效避免类 似于非热启动型聚合酶导致的非特异性扩增反应，从而提升 PCR 扩增效率。同时也能够针对不同 GC 含量 的基因完成理想扩增，获得高灵敏度的 qPCR 检测结果。


产品特点
1. 无需核酸提取或者纯化，直接对原始血卡样本进行 Taqman qPCR 反应，省时省力；
2. 配合专门开发的高性能样本预处理组分 Buffer BCL01，直接 qPCR 反应效果可媲美以高纯 DNA 提取产物 作为模板的反应效果；
3. 使用了抗体封闭的突变型聚合酶，可以进行 Hot Start 法 PCR 反应，与特别开发的 Buffer 系统相结合，具 有高扩增效率、高扩增灵敏度的特点；
4. 可针对高 GC 含量片段进行有效扩增，扩增能力强。


扩增体系和条件
1. 样本预处理
1) 向 0.2 mL EP 管（或 96 孔 PCR 板）中加入 50 µL Buffer BCL01；
2) 用剪刀（或者打孔器）剪取 1~2 片 2 mm2尺寸的干血片，加入到 Buffer BCL01 中，瞬离确保干血片完 全浸入到液体中；
3) 将EP管于95℃下加热5min后，置于平板离心机4000g离心2min（或台式离心机12,000RPM 离心2min）， 可直接吸取上清液作为 PCR 反应模板使用。
2.反应体系构建



*备注：
0.2 μM 终浓度的引物(Primer)和探针(Probe)，可满足大部分的实验要求，用户亦可根据经验对 Prime 和 Probe 浓度进行调整。


3.反应程序




注意事项
1. Master Mix 使用前上下轻柔颠倒数次，确保各试剂成份完全混匀，并短暂离心收集试剂至容器底部，试